IPTG CAS:367-93-1 उत्पादक किंमत
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) हे लैक्टोजचे सिंथेटिक अॅनालॉग आहे जे सामान्यतः आण्विक जीवशास्त्र संशोधन आणि जैवतंत्रज्ञान अनुप्रयोगांमध्ये वापरले जाते.IPTG प्रामुख्याने जिवाणू प्रणालींमध्ये जनुकांच्या अभिव्यक्तीला प्रेरित करण्यासाठी वापरले जाते, जेथे ते लक्ष्यित जनुकांचे प्रतिलेखन सुरू करण्यासाठी आण्विक ट्रिगर म्हणून कार्य करते.
वाढीच्या माध्यमात जोडल्यावर, IPTG बॅक्टेरियाद्वारे घेतला जातो आणि लाख रेप्रेसर प्रोटीनला बांधता येतो, ज्यामुळे ते लाख ओपेरॉनची क्रिया रोखू शकते.लैक ऑपेरॉन हे लैक्टोज चयापचय मध्ये गुंतलेल्या जनुकांचा एक समूह आहे आणि जेव्हा रिप्रेसर प्रोटीन काढून टाकले जाते, तेव्हा जीन्स व्यक्त होतात.
IPTG चा वापर अनेकदा lacUV5 म्युटंट प्रवर्तकाच्या संयोगाने केला जातो, जो लाख प्रवर्तकाची घटकात्मक सक्रिय आवृत्ती आहे.या उत्परिवर्तन प्रवर्तकासह IPTG इंडक्शन एकत्र करून, संशोधक जनुक अभिव्यक्तीची उच्च पातळी प्राप्त करू शकतात.हे शुध्दीकरण किंवा इतर डाउनस्ट्रीम ऍप्लिकेशन्ससाठी मोठ्या प्रमाणात प्रथिने तयार करण्यास अनुमती देते.
जनुक अभिव्यक्ती व्यतिरिक्त, IPTG चा वापर निळ्या/पांढऱ्या स्क्रीनिंग ऍसेसमध्ये देखील केला जातो.या तंत्रात, lacZ जनुक सामान्यत: स्वारस्य असलेल्या जनुकामध्ये मिसळले जाते आणि या फ्यूजन जनुकाला यशस्वीरित्या व्यक्त करणारे जीवाणू सक्रिय β-galactosidase एंझाइम तयार करतात.जेव्हा X-gal सारख्या क्रोमोजेनिक सब्सट्रेटसह IPTG जोडले जाते, तेव्हा β-galactosidase च्या क्रियाकलापामुळे फ्यूजन जनुक व्यक्त करणारे जीवाणू निळे होतात.हे रीकॉम्बिनंट स्ट्रेनची ओळख आणि निवड करण्यास अनुमती देते ज्यांनी स्वारस्यपूर्ण जनुक यशस्वीरित्या एकत्रित केले आहे.
जनुक अभिव्यक्तीचे प्रेरण: IPTG सामान्यतः जिवाणू प्रणालींमध्ये लक्ष्य जनुकांच्या अभिव्यक्तीला प्रेरित करण्यासाठी वापरले जाते.हे नैसर्गिक प्रेरक लैक्टोजची नक्कल करते आणि लाख रेप्रेसर प्रोटीनला बांधते, ते लाख ओपेरॉन अवरोधित करण्यापासून प्रतिबंधित करते.हे इच्छित जनुकांचे प्रतिलेखन आणि अभिव्यक्ती करण्यास अनुमती देते.
प्रथिने अभिव्यक्ती आणि शुद्धीकरण: आयपीटीजी इंडक्शनचा वापर बहुधा जैवरासायनिक अभ्यास, उपचारात्मक उत्पादन किंवा संरचनात्मक विश्लेषण यासारख्या विविध उद्देशांसाठी मोठ्या प्रमाणात रीकॉम्बिनंट प्रथिने तयार करण्यासाठी केला जातो.योग्य अभिव्यक्ती वेक्टर आणि IPTG इंडक्शन वापरून, संशोधक जिवाणू यजमानांमध्ये उच्च पातळीचे लक्ष्य प्रोटीन उत्पादन साध्य करू शकतात.
निळा/पांढरा स्क्रिनिंग: IPTG चा वापर वारंवार lacZ जनुक आणि X-gal सारख्या क्रोमोजेनिक सब्सट्रेटच्या संयोगाने निळा/पांढरा स्क्रिनिंग असेससाठी केला जातो.lacZ जनुक सामान्यत: स्वारस्य असलेल्या जनुकाशी जोडले जाते आणि हे फ्यूजन जनुक यशस्वीरित्या व्यक्त करणारे जीवाणू सक्रिय β-galactosidase एंझाइम तयार करतात.जेव्हा IPTG आणि क्रोमोजेनिक सब्सट्रेट जोडले जातात, तेव्हा फ्यूजन जनुक व्यक्त करणारे रीकॉम्बिनंट स्ट्रेन निळे होतात, ज्यामुळे ओळख आणि निवड करणे सोपे होते.
जनुक नियमनाचा अभ्यास: आयपीटीजी इंडक्शनचा वापर सामान्यतः जीन्स आणि ऑपेरॉनच्या नियमनाचा अभ्यास करण्यासाठी संशोधनात केला जातो, विशेषत: लाख ओपेरॉन.IPTG च्या एकाग्रतेमध्ये फेरफार करून आणि लाख ओपेरॉन घटकांच्या अभिव्यक्तीचे परीक्षण करून, संशोधक जीन नियमन आणि विविध घटक किंवा उत्परिवर्तनांच्या भूमिकेची तपासणी करू शकतात.
जनुक अभिव्यक्ती प्रणाली: IPTG अनेक जनुक अभिव्यक्ती प्रणालींमध्ये एक महत्त्वपूर्ण घटक आहे, जसे की T7 प्रवर्तक-आधारित प्रणाली.या प्रणालींमध्ये, लाख प्रवर्तक बहुतेकदा T7 RNA पॉलिमरेझची अभिव्यक्ती चालविण्यासाठी वापरला जातो, जो यामधून, T7 प्रवर्तक अनुक्रमांच्या नियंत्रणाखाली लक्ष्य जनुकांचे प्रतिलेखन करतो.IPTG चा वापर T7 RNA पॉलिमरेजच्या अभिव्यक्तीला प्रेरित करण्यासाठी केला जातो, ज्यामुळे लक्ष्य जनुक अभिव्यक्ती सक्रिय होते.
रचना | C9H18O5S |
परख | ९९% |
देखावा | पांढरी पावडर |
CAS क्र. | ३६७-९३-१ |
पॅकिंग | लहान आणि मोठ्या प्रमाणात |
शेल्फ लाइफ | 2 वर्ष |
स्टोरेज | थंड आणि कोरड्या ठिकाणी साठवा |
प्रमाणन | आयएसओ. |