4-नायट्रोफेनिल बीटा-डी-गॅलेक्टोपिरानोसाइड CAS:200422-18-0

प्रभाव: ONPG हा एक सब्सट्रेट आहे जो विशेषतः β-galactosidase एंझाइमची उपस्थिती आणि क्रियाकलाप शोधण्यासाठी वापरला जातो.जेव्हा β-galactosidase enzyme असते आणि सक्रिय असते, तेव्हा ते ONPG ला दोन उत्पादनांमध्ये विभाजित करते: o-nitrophenol आणि एक galactose derivative.ओ-नायट्रोफेनॉलच्या मुक्तीमुळे पिवळा रंग बदलतो, जो स्पेक्ट्रोफोटोमीटर वापरून मोजला जाऊ शकतो.

अर्ज: ONPG मध्ये आण्विक जीवशास्त्र आणि बायोकेमिस्ट्री संशोधनामध्ये अनेक अनुप्रयोग आहेत:

β-galactosidase क्रियाकलापांचे निर्धारण: ONPG चा वापर सामान्यतः β-galactosidase enzyme च्या क्रियाकलाप मोजण्यासाठी आणि परिमाण करण्यासाठी केला जातो.ओ-नायट्रोफेनॉल निर्मितीचा दर, जो एंजाइमच्या क्रियाकलापाशी थेट प्रमाणात असतो, स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक पद्धतीने मोजला जाऊ शकतो.

जनुक अभिव्यक्ती आणि नियमन: जनुक अभिव्यक्ती आणि नियमन अभ्यासांशी संबंधित प्रयोगांमध्ये ONPG चा वापर केला जातो.विशिष्ट प्रवर्तकांच्या नियंत्रणाखाली जीन्सच्या अभिव्यक्तीचा अभ्यास करण्यासाठी सामान्यतः वापरल्या जाणार्‍या lacZ फ्यूजन प्रणालीसारख्या फ्यूजन प्रोटीन ऍसेजमध्ये याचा वारंवार वापर केला जातो.ONPG वापरून मोजली जाणारी बीटा-गॅलेक्टोसिडेस क्रियाकलाप जनुक अभिव्यक्तीच्या पातळीबद्दल अंतर्दृष्टी प्रदान करते.

β-galactosidase क्रियाकलापासाठी स्क्रीनिंग: ONPG ला β-galactosidase एन्कोड करणार्‍या LacZ जनुकाची उपस्थिती आणि कार्यक्षमता ओळखण्यासाठी रीकॉम्बिनंट DNA तंत्रज्ञानामध्ये कलरमेट्रिक स्क्रीनिंग पद्धत म्हणून वापरली जाऊ शकते.ही स्क्रीनिंग पद्धत क्लोन ओळखण्यात मदत करते ज्यामध्ये स्वारस्य असलेले जनुक असते.

एंजाइम गतीशास्त्र अभ्यास: ONPG β-galactosidase enzyme च्या गतीशास्त्राचा अभ्यास करण्यासाठी देखील उपयुक्त आहे.वेगवेगळ्या सब्सट्रेट एकाग्रतेवर एन्झाइम-सबस्ट्रेट अभिक्रियाचा दर मोजून, मायकेलिस-मेंटेन स्थिरांक (किमी) आणि कमाल प्रतिक्रिया दर (व्हीमॅक्स) सारखे गतिज मापदंड निर्धारित करणे शक्य आहे.