४-नायट्रोफेनिल बीटा-डी-गॅलॅक्टोपायरॅनोसाइड सीएएस:२००४२२-१८-०

परिणाम: ONPG हे एक सबस्ट्रेट आहे, जे विशेषतः β-galactosidase नावाच्या एन्झाइमची उपस्थिती आणि क्रियाशीलता ओळखण्यासाठी वापरले जाते. जेव्हा β-galactosidase एन्झाइम उपस्थित आणि सक्रिय असते, तेव्हा ते ONPG चे विघटन करून ओ-नायट्रोफेनॉल आणि गॅलॅक्टोज डेरिव्हेटिव्ह ही दोन उत्पादने तयार करते. ओ-नायट्रोफेनॉलच्या मुक्तीमुळे पिवळा रंग बदलतो, जो स्पेक्ट्रोफोटोमीटर वापरून मोजता येतो.

उपयोग: आण्विक जीवशास्त्र आणि जैवरसायनशास्त्र संशोधनामध्ये ONPG चे अनेक उपयोग आहेत:

बीटा-गॅलॅक्टोसिडेस क्रियाशीलतेचे निर्धारण: बीटा-गॅलॅक्टोसिडेस एन्झाइमची क्रियाशीलता मोजण्यासाठी आणि तिचे प्रमाण निश्चित करण्यासाठी सामान्यतः ONPG चा वापर केला जातो. ओ-नायट्रोफेनॉल निर्मितीचा दर, जो एन्झाइमच्या क्रियाशीलतेशी थेट प्रमाणात असतो, तो स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक पद्धतीने मोजता येतो.

जनुकीय अभिव्यक्ती आणि नियमन: जनुकीय अभिव्यक्ती आणि नियमन अभ्यासाशी संबंधित प्रयोगांमध्ये ONPG चा वापर अनेकदा केला जातो. विशिष्ट प्रमोटर्सच्या नियंत्रणाखाली असलेल्या जनुकांच्या अभिव्यक्तीचा अभ्यास करण्यासाठी, सामान्यतः वापरल्या जाणाऱ्या lacZ फ्यूजन सिस्टीमसारख्या फ्यूजन प्रोटीन अ‍ॅसेजमध्ये याचा वारंवार उपयोग केला जातो. ONPG वापरून मोजलेली बीटा-गॅलॅक्टोसिडेस क्रियाशीलता जनुकीय अभिव्यक्तीच्या पातळीबद्दल अंतर्दृष्टी प्रदान करते.

बीटा-गॅलॅक्टोसिडेस क्रियाशीलतेसाठी तपासणी: बीटा-गॅलॅक्टोसिडेसचे संकेतन करणाऱ्या LacZ जनुकाची उपस्थिती आणि कार्यक्षमता ओळखण्यासाठी, पुनर्संयोजित डीएनए तंत्रज्ञानामध्ये ONPG चा वापर एक रंगमापन तपासणी पद्धत म्हणून केला जाऊ शकतो. ही तपासणी पद्धत इच्छित जनुक असलेल्या क्लोन्सना ओळखण्यास मदत करते.

एन्झाइम गतिकी अभ्यास: β-galactosidase एन्झाइमच्या गतिकीचा अभ्यास करण्यासाठी ONPG देखील उपयुक्त आहे. वेगवेगळ्या सबस्ट्रेट सांद्रतेवर एन्झाइम-सबस्ट्रेट अभिक्रियेचा दर मोजून, मायकेलिस-मेंटेन स्थिरांक (Km) आणि कमाल अभिक्रिया दर (Vmax) यांसारखे गतिकी मापदंड निश्चित करणे शक्य होते.